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在做免疫熒光（IF），激光共聚焦(Confocal)，凋亡檢測（TUNEL）時(shí)，免不了要制備細胞爬片，爬片質(zhì)量*決定了后拍照的質(zhì)量以及實(shí)驗數據的精準性?，F就如何制備好的細胞爬片介紹。

細胞株實(shí)驗操作流程：

1.消化細胞后計數重懸細胞于*培養基中（懸浮細胞直接離心）。

2. 加細胞時(shí)，根據玻片的大小，先在每個(gè)孔里準備放爬片的位置滴少量培養基，目的是使玻片與培養皿靠培養基的張力粘合到一起，然后放玻片，防止加細胞懸液時(shí)玻片漂起，造成雙層細胞貼片。整個(gè)過(guò)程注意無(wú)菌操作。

3. 根據自己的需要選擇合適的細胞密度種入培養板內即可

保存細胞爬片時(shí)，一般用培養皿或避光濕盒，先在皿底放一層面巾紙，然后再放爬片，這樣方便做實(shí)驗時(shí)取片。然后蓋上蓋子，并在蓋子上做標記，為避免混淆。一般-20℃保存2-3月的片子去拍照沒(méi)有問(wèn)題的。

細胞株進(jìn)行實(shí)驗注意事項：

1. 使用細胞爬片時(shí)（比如在六孔板中放入爬片，六孔板的孔底面積往往會(huì )比爬片面積多出一部分，加細胞懸液時(shí)常常就是細胞鋪滿(mǎn)整個(gè)孔底，有時(shí)細胞生長(cháng)邊集現象，就是靠近壁邊緣密度要高些，這樣處于中央玻片上爬的細胞數量就可能相對較少）。比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內后，加細胞懸液時(shí)只滴到玻片上，一直滴到液體布滿(mǎn)整個(gè)玻片又不會(huì )溢出玻片邊緣。

2. 按照實(shí)驗設計，作用一定時(shí)間后取玻片。注意細胞不能太密，否則容易掉片。

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