把細胞系養好的三個(gè)關(guān)鍵要素是:良好的細胞來(lái)源,正確的實(shí)驗操作,以及合適的培養體系。其中“合適的培養體系"就是要創(chuàng )造適合細胞生長(cháng)的環(huán)境,給細胞建立一個(gè)滿(mǎn)意的“家"。
細胞培養基本條件:
1.合適的細胞培養基
合適的細胞培養基是體外細胞生長(cháng)增殖的重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營(yíng)養和促使細胞生長(cháng)增殖的基礎物質(zhì),而且還提供培養細胞生長(cháng)和繁殖的生存環(huán)境。
2.血清
目前,大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中重要的成分之一,含有細胞生長(cháng)所需的多種生長(cháng)因子及其它營(yíng)養成分。
3.細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長(cháng),必須有恒定而適宜的溫度。不同種類(lèi)的細胞對培養溫度要求也不同。人體細胞培養的標準溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會(huì )受到影響,甚至死亡。
4.無(wú)菌無(wú)毒細胞培養環(huán)境
無(wú)菌無(wú)毒的操作環(huán)境和培養環(huán)境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染,或者自身代謝物質(zhì)積累,可導致細胞中毒死亡。因此,在體外培養細胞時(shí),必須保持細胞生存環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒,及時(shí)清除細胞代謝產(chǎn)物。
5.恒定的細胞生長(cháng)溫度
維持培養細胞旺盛生長(cháng),必須有恒定適宜的溫度。
6.合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動(dòng)物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。
7.合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動(dòng)物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生供給細胞生長(cháng)增殖的能量和合成細胞生長(cháng)所需用的各種成分。
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